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以下为文章的中文翻译。参考文献(References)部分不翻译;正文中的作者—年份引文保留,以便与原文对应。物种学名和菌株编号也保留原文形式。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

洋葱紫斑病病原菌 Alternaria porri 的培养性状、形态学及致病性特征研究

Sayed Mohammad MOHSIN¹,Md. Rafiqul ISLAM¹,Abu Noman Faruq AHMMED¹,Hosna Ara Chowdhury NISHA¹,Mirza HASANUZZAMAN²*

¹ 孟加拉国达卡 Sher-e-Bangla 农业大学植物病理学系
² 孟加拉国达卡 Sher-e-Bangla 农业大学农学系
* 通讯作者

摘要

从孟加拉国不同洋葱种植区采集的病叶样品中共分离获得27个 Alternaria porri 菌株,并对其培养性状、形态学特征及致病性变异进行了研究。

A. porri 菌落颜色从浅橄榄色、深橄榄色到灰白色不等;菌落形状包括不规则形、具有同心轮纹的规则形以及无同心轮纹的规则形。菌落边缘可表现为全缘、不规则或波浪状,菌落质地则有扩散型、蓬松型和绒状型。培养皿背面的培养基颜色从灰色到棕色不等。

各菌株的生长速率为2.433~3.950 mm/天,其中DSTR 02生长最快,MMBH生长最慢。分生孢子产生量表现出明显的形态学差异,为7.720×10³~47.02×10³个/mm²,产孢所需时间为3.33~11.00天。分生孢子呈直形至弯曲形,颜色由浅棕色至深棕色。分生孢子的横隔数和纵隔数分别为3.00~6.00和1.00~2.00,孢子大小为11.20~39.20 × 4.76~11.43 μm。

致病性试验中,不同菌株在洋葱叶片上形成的病斑大小也存在差异,为2.77~7.55 mm。结果表明,在孟加拉国环境条件下流行的 A. porri 菌株在培养性状、形态学特征和致病性方面存在相当大的变异。

关键词: 同心轮纹;分生孢子;真菌病害;菌丝体;砖格状


引言

洋葱(Allium cepa)是一种重要的香辛料作物,在世界许多国家均有商业化种植。在联合国粮农组织(FAO)列出的15种重要蔬菜和香辛料作物中,洋葱按全球年产量排名第二(Ali, 2008)。

洋葱的起源中心包括伊朗、巴基斯坦,尤其是这些国家北部的山区(Purseglove, 1972; Islam, 2006)。除作为沙拉和蔬菜食用外,洋葱在大多数亚洲国家通常还被用作调味香料。由于具有药用和膳食价值,洋葱具有重要的经济意义(Chakraborty et al., 2015)。

全球洋葱年产量接近3600万吨,在蔬菜作物中仅次于番茄和甘蓝,因此具有重要地位(FAO, 2012)。孟加拉国约有135,569.69公顷土地用于洋葱生产,产量约为115.9万吨,而每年的需求量约为195万吨(BBS, 2012)。

在世界主要洋葱生产国中,韩国单位面积产量最高,为65.25 t/ha,其后依次为美国53.91 t/ha、西班牙52.06 t/ha和日本47.55 t/ha(FAO, 2008)。孟加拉国洋葱产量仅为8.95 t/ha(AIS, 2011),远低于其他洋葱生产国。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

洋葱可遭受66种病害,包括10种细菌性病害、38种真菌性病害、6种线虫病害、3种病毒病害、1种支原体病害、1种寄生植物病害以及7种其他病害和生理性障碍(Schwartz, 2010)。

洋葱紫斑病是世界范围内包括孟加拉国在内的一种主要病害,其病原菌为 A. porri(Islam et al., 2001)。该病可造成30%~50%的产量损失(Pascua et al., 1997)。印度曾报道种子产量损失约20%~25%(Thind and Jhooty, 1982),孟加拉国的损失则达到41%~44%(Hossain et al., 1993)。

关于洋葱紫斑病的防治已经开展了大量研究(Ashrafuzzaman and Ahmed, 1976; Rahman et al., 1988; Rahman, 1990)。Rovral 50WP(0.2%)、Dithane M-45(0.2%)以及其他杀菌剂通常通过叶面喷施来防治该病。然而,目前许多杀菌剂已经无法有效抑制病害的发展。这可能是由于病原菌产生了遗传变异,或者出现了新的病原菌生理小种。

通常可根据形态学、培养性状和致病专化性来检测病原菌群体的变异。开展变异性研究对于记录群体及个体所发生的变化十分重要,因为形态和生理特征的变异能够表明不同致病型的存在。

Alternaria 属中,变异是一种众所周知的现象,可表现为孢子形状和大小、生长、产孢以及致病性等方面的变化。

因此,本研究旨在鉴定和描述 A. porri 的不同菌株,并明确这些菌株在形态学和致病性方面的变异程度。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf) (10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

材料与方法

病叶样品的采集

病叶样品采自孟加拉国9个地区,分别为Dhaka、Mymensingh、Rajshahi、Gazipur、Comilla、Jamalpur、Manikganj、Jessore和Faridpur。

这些地区分布于不同的地理位置,并具有不同的气候条件(表1)。样品均于2月份采集,这些地区主要使用化学杀菌剂进行病害防治。

从田间生长的植株上剪取病叶,放入牛皮纸信封中,并带回达卡Sher-e-Bangla农业大学植物病理学系实验室进行病原菌分离。样品采集后立即进行培养。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

病原菌的分离与鉴定

病原菌采用组织培养法进行分离(Ali, 2008)。

将病叶切成直径约4 mm的小块,用HgCl₂(1:1000)进行表面消毒30秒。随后用无菌水冲洗3次,并置于未经处理的吸水纸上吸干水分,然后接种于装有酸化PDA培养基的培养皿中。

培养皿在25 ℃以及近紫外光条件下培养7天。当真菌充分生长并产生孢子后,制备病原菌玻片,分别使用体视显微镜(型号:Motic SMZ-168)和复式显微镜(型号:Omano OMTM-85)进行观察,并参考相关文献(CMI Description Vol. No. 338)鉴定病原菌。

该病原菌的分生孢子呈砖格状,具有逐渐变细的喙部,颜色为棕色。

鉴定为 A. porri 后,将其在PDA培养基上进行纯化,并于4±0.5 ℃冰箱中保存,以供后续研究使用。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

所采集菌株的编号

菌株依据Aminuzzaman et al.(2010)的方法,根据采集地点和来源进行编号。

例如,编号为JMSA 01的菌株表示该菌株采自Jessore地区(J)、Monirumpur分区(M)、Shempur联合区(S)、Aminpur村(A),其中01表示采集编号。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

Alternaria porri 的培养性状变异

在培养性状研究中,于接种后第4、6、8、10、12和14天测量菌落直径。

每日生长量按下式计算:

mm/天 =(某次观察到的生长量 − 前一次观察的生长量)÷ 2

同时还记录菌落颜色、形状、边缘、质地及培养基底面颜色等培养性状。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

表1 洋葱紫斑病病原菌 Alternaria porri 的样品采集地点

编号菌株地区采样地点地理位置气候条件
1DSSADhakaSAU23.77°N,90.33°E降雨量22 mm;温度16.2~28.3 ℃
2DSTR 01DhakaSavar23.51°N,90.16°E同上
3DSTR 02DhakaSavar23.51°N,90.16°E同上
4MMBHMymensinghMymensingh Sadar24.45°N,90.25°E降雨量19 mm;温度14.9~27.0 ℃
5MTBB 01MymensinghTrishal24.34°N,90.23°E同上
6MTBB 02MymensinghTrishal24.34°N,90.23°E同上
7RBHR 01RajshahiTaherpur24.22°N,88.36°E降雨量14 mm;温度13.2~27.9 ℃
8RBHR 02RajshahiTaherpur同上同上
9RBHR 03RajshahiTaherpur同上同上
10GJBSGazipurBARI23.59°N,90.25°E降雨量21 mm;温度15.4~27.2 ℃
11GGBB 01GazipurGazipur Sadar24.0°N,90.25°E同上
12GGBB 02GazipurGazipur Sadar同上同上
13CCKH 01ComillaChandina23.29°N,91.0°E降雨量21 mm;温度15.5~27.7 ℃
14CCKH 02ComillaChandina同上同上
15CCKH 03ComillaChandina同上同上
16JJLL 01JamalpurJamalpur Sadar24.55°N,89.57°E降雨量18 mm;温度14.3~26.9 ℃
17JJLL 02JamalpurJamalpur Sadar同上同上
18JJLL 03JamalpurJamalpur Sadar同上同上
19MSMM 01ManikganjShibalaya23.50°N,89.47°E降雨量23 mm;温度15.2~27.9 ℃
20MSMM 02ManikganjShibalaya同上同上
21MSMM 03ManikganjShibalaya同上同上
22JMSA 01JessoreMonirumpur23.1°N,89.14°E降雨量25 mm;温度14.7~28.9 ℃
23JMSA 02JessoreMonirumpur同上同上
24JMSA 03JessoreMonirumpur同上同上
25FFKU 01FaridpurFaridpur Sadar23.35°N,89.49°E降雨量26 mm;温度15.1~27.9 ℃
26FFKU 02FaridpurFaridpur Sadar同上同上
27FFKU 03FaridpurFaridpur Sadar同上同上

资料来源: Wikipedia及Bangladesh Metrological Department。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

Alternaria porri 的形态学变异

采用培养15天的所有菌株进行形态学变异研究。在PDA培养基上观察分生孢子的颜色、形状、大小、分隔情况、产孢时间以及分生孢子产生量。

使用数字显微镜(型号:Motic BA-210)及Motic软件测定分生孢子的长度和宽度。每个重复测量20个分生孢子。

采用血球计数板和数字显微镜,并根据Chauhan and Pandey(1995)的公式估算单位表面积产生的分生孢子数量:

单位表面积分生孢子产生量 =(分生孢子数/mL × 悬浮液用水体积)÷ 悬浮液覆盖的总表面积

Alternaria porri 的致病性变异

为测定不同 A. porri 菌株的毒力水平,从Dhaka的Savar Bazar采集当地洋葱品种“Taherpuri”的鳞茎。

将风干的砂壤土与牛粪按4:1比例充分混合,装入直径20 cm的土盆中,在网室内采用完全随机设计(CRD)进行试验,设3个重复。

利用培养10天的PDA菌落,以无菌水配制 A. porri 分生孢子悬浮液,并将分生孢子浓度调整为 21×10⁵个/mL

定植30天后,用27个 A. porri 菌株分别对植株进行接种。首先用无菌牙签刺伤洋葱叶片,然后用微量移液器在伤口表面滴加1滴接种悬浮液,每片叶接种1处。

接种后的植株用聚乙烯袋覆盖,以保持较高的相对湿度,同时避免其他真菌的分生孢子或孢子造成自然污染。

接种5天后开始记录病斑大小,并分别在第5、7、9、11、13、15和17天进行测量。

病斑每日增加量(mm/天)按下式计算:

(某次观察的叶片病斑大小 − 前一次观察的叶片病斑大小)÷ 2。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

数据分析

收集的数据经整理后,使用统计软件MSTAT-C(Freed and Scott, 1986),采用方差分析(ANOVA)进行统计分析。

不同处理平均值之间的差异采用Duncan多重极差检验(Duncan’s Multiple Range Test)进行比较(Gomez and Gomez, 1986)。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

结果

Alternaria porri 的培养性状变异

就培养特征而言,不同 A. porri 菌株在生长速率、菌落颜色、菌落形状、菌落边缘、质地及培养基底面颜色等方面均存在变异。

不同菌株的生长速率(mm/天)存在明显差异。DSTR 02的菌丝径向生长增速最高,为 3.95 mm/天;MMBH最低,为 2.43 mm/天(图1)。

在27个菌株中:

  • 7个菌株的菌落为深橄榄绿色;
  • 12个为浅橄榄绿色;
  • 1个为灰白色;
  • 7个为橄榄绿色。

菌落形状方面:

  • 5个为不规则形;
  • 16个为具有同心轮纹的规则形;
  • 6个为无同心轮纹的规则形。

菌落边缘方面:

  • 19个为全缘;
  • 5个为不规则边缘;
  • 3个为波浪状边缘。

菌落质地方面:

  • 17个为扩散型;
  • 1个为蓬松型;
  • 8个为绒状型。

培养基底面颜色方面:

  • 2个菌株呈灰色;
  • 15个呈深棕色;
  • 10个呈浅棕色(表2)。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

表2 27个 Alternaria porri 菌株在PDA培养基上的菌落特征

菌落颜色

特征菌株
深橄榄绿色DSSA、RBHR 01、GJBS、GGBB 01、GGBB 02、JJLL 01、JMSA 01
灰白色MMBH
浅橄榄绿色DSTR 01、DSTR 02、RBHR 02、RBHR 03、CCKH 01、CCKH 03、JJLL 02、JMSA 02、JMSA 03、FFKU 01、FFKU 02、FFKU 03
橄榄绿色MTBB 01、MTBB 02、CCKH 02、JJLL 03、MSMM 01、MSMM 02、MSMM 03

菌落形状

特征菌株
不规则MMBH、RBHR 01、GJBS、CCKH 01、JJLL 02
规则、有同心轮纹DSSA、DSTR 01、DSTR 02、RBHR 02、RBHR 03、GGBB 01、GGBB 02、CCKH 03、JJLL 01、JJLL 03、MSMM 02、MSMM 03、JMSA 01、JMSA 02、JMSA 03、FFKU 02
规则、无同心轮纹MTBB 01、MTBB 02、CCKH 02、MSMM 01、FFKU 01、FFKU 03

菌落边缘

特征菌株
全缘DSSA、DSTR 02、MTBB 02、RBHR 02、RBHR 03、GJBS、GGBB 02、CCKH 01、CCKH 02、CCKH 03、JJLL 01、JJLL 02、JJLL 03、MSMM 02、MSMM 03、JMSA 01、JMSA 03、FFKU 01、FFKU 02
不规则MTBB 01、RBHR 01、GGBB 01、JMSA 02、FFKU 03
波浪状DSTR 01、MMBH、MSMM 01

菌落质地

特征菌株
扩散型DSSA、MTBB 01、MTBB 02、RBHR 01、GJBS、GGBB 01、GGBB 02、CCKH 01、CCKH 02、CCKH 03、JJLL 03、JMSA 01、JMSA 02、JMSA 03、FFKU 01、FFKU 02、FFKU 03
蓬松型MMBH
绒状型DSTR 01、DSTR 02、RBHR 02、RBHR 03、JJLL 01、JJLL 02、MSMM 01、MSMM 02、MSMM 03

培养基底面颜色

特征菌株
灰色MMBH、GJBS
深棕色DSSA、MTBB 01、MTBB 02、RBHR 01、RBHR 02、GGBB 01、GGBB 02、CCKH 01、CCKH 02、JJLL 03、JMSA 01、JMSA 02、JMSA 03、FFKU 01、FFKU 03
浅棕色DSTR 01、DSTR 02、RBHR 03、CCKH 03、JJLL 01、JJLL 02、MSMM 01、MSMM 02、MSMM 03、FFKU 02

(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

图1. 27个 Alternaria porri 菌株每日菌丝径向平均生长量。

Alternaria porri 的形态学变异

不同 A. porri 菌株在分生孢子产生量、产孢、孢子形状和颜色、孢子分隔情况以及孢子大小方面均表现出变异(表3)。

最高分生孢子产生量为 47.02×10³个/mm²,出现在DSSA菌株中;最低为 7.72×10³个/mm²,出现在MMBH菌株中(图2)。

最长产孢时间为11.00天,出现在MMBH菌株中;最短产孢时间为3.33天,出现在MTBB 01和MSMM 02菌株中。

所有菌株产生的分生孢子颜色均由浅棕色至深棕色不等,形状为直形或弯曲形。

平均横隔数最高为3.56,出现在DSSA中;最低为3.20,出现在GGBB 01中。

平均纵隔数最高为1.40,出现在DSSA和DSTR 02中;最低为1.13,出现在MTBB 02、JJLL 03和MSMM 03中。

平均分生孢子长度最高为 28.31 μm,出现在MMBH中;最低为 19.38 μm,出现在RBHR 01中。

平均分生孢子宽度最高为 8.147 μm,出现在MSMM 01中;最低为 6.740 μm,出现在RBHR 03中(图3)。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

图2. 使用血球计数板和数字显微镜计数 Alternaria porri 分生孢子:(A)DSSA菌株;(B)MMBH菌株。

图3. Alternaria porri 分生孢子的测量:(A)MMBH菌株;(B)RBHR 01菌株。

表3 27个 Alternaria porri 菌株的形态学变异

菌株分生孢子数/mm²(×10³)产孢时间(天)横隔纵隔长度(μm)宽度(μm)形状颜色
DSSA47.02 a4.00 b3.561.40 a19.91 ij7.29 b-d直/弯棕色
DSTR 0140.40 b3.66 b3.461.30 ab23.20 d-g7.71 a-c棕色
DSTR 0237.60 bc3.66 b3.261.40 a20.45 h-j7.53 a-c棕色
MMBH7.72 j11.00 a3.361.26 ab28.31 a7.33 a-d深棕色
MTBB 0134.20 c-e3.33 b3.261.23 ab19.73 j7.57 a-c棕色
MTBB 0232.85 c-e3.66 b3.261.13 b20.27 h-j7.63 a-c棕色
RBHR 0127.92 e-h4.33 b3.431.23 ab19.38 j7.18 cd棕色
RBHR 0222.83 hi3.66 b3.301.30 ab20.90 h-j7.46 a-d棕色
RBHR 0320.62 i3.66 b3.431.26 ab19.82 j6.74 d棕色
GJBS36.92 b-d4.33 b3.261.23 ab19.49 j7.41 a-d浅棕色
GGBB 0140.65 b4.00 b3.201.30 ab19.87 ij7.27 cd棕色
GGBB 0233.86 c-e3.66 b3.301.20 ab20.13 h-j7.51 a-d棕色
CCKH 0131.06 d-f4.00 b3.261.23 ab24.55 cd7.67 a-c直/弯棕色
CCKH 0225.55 f-i4.00 b3.261.20 ab22.15 e-h7.68 a-c棕色
CCKH 0325.46 f-i3.66 b3.261.20 ab21.40 f-j7.45 a-d棕色
JJLL 0133.61 c-e4.00 b3.401.20 ab27.23 ab8.13 a棕色
JJLL 0230.55 e-g3.66 b3.231.23 ab23.46 d-f7.70 a-c棕色
JJLL 0329.11 e-h3.66 b3.261.13 b22.05 e-i7.69 a-c棕色
MSMM 0123.93 hi4.00 b3.231.26 ab26.24 bc8.14 a棕色
MSMM 0223.00 hi3.33 b3.361.16 b23.09 d-g7.91 a-c直/弯深棕色
MSMM 0323.26 hi4.00 b3.331.13 b21.18 g-j7.80 a-c棕色
JMSA 0125.03 f-i3.66 b3.431.20 ab25.74 bc8.09 ab棕色
JMSA 0223.42 hi3.66 b3.231.16 b23.59 de7.84 a-c浅棕色
JMSA 0325.89 f-i4.00 b3.331.20 ab23.54 d-f7.67 a-c棕色
FFKU 0124.44 g-i4.00 b3.261.20 ab22.12 e-h7.54 a-c直/弯棕色
FFKU 0224.61 f-i4.00 b3.301.16 b21.27 g-j7.17 cd棕色
FFKU 0326.22 f-i4.00 b3.301.30 ab20.43 h-j7.28 b-d棕色

显著性: 分生孢子数量 **;产孢时间 **;横隔 ns;纵隔 *;孢子长度 **;孢子宽度 *。
CV(%): 11.68%、20.47%、5.85%、8.51%、5.09%、5.38%。

注:ns=差异不显著;*=P=0.05水平显著;**=P=0.01水平显著。平均值后不同小写字母表示在P=0.05或P=0.01水平存在显著差异。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

Alternaria porri 的致病性变异

盆栽试验中,27个不同 A. porri 菌株造成的洋葱叶片感染程度存在显著差异。

每日叶片病斑增长量最高的是MMBH菌株,为 7.55 mm;最低的是DSTR 02菌株,为 2.77 mm(图4)。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

图4. 27个 Alternaria porri 菌株造成的洋葱叶片每日平均病斑增长量。

讨论

不同 A. porri 菌株的生长速率(mm/天)存在差异。DSTR 02在所有菌株中生长最快,平均生长速率为3.95 mm/天,而MMBH生长最慢,平均生长速率为2.43 mm/天。

本研究中的菌株生长速率呈现周期性变化,但所有菌株的总体生长速率均呈上升趋势。

Sofi et al.(2013)也报道,A. mali 菌株的生长速率为5.86~8.21 mm/天。Goyal et al.(2011)发现,从不同地理区域采集的13个 A. brassicae 菌株在菌丝生长方面存在变异。

Ansari et al.(1989)、Patni et al.(2005)及Kaur et al.(2007)也发现 Alternaria 属不同菌株之间存在菌丝生长变异。Pusz(2009)研究 A. alternata 时发现,其菌落直径范围为4.8~6.8 cm。Thrall et al.(2005)以及Rai and Kumari(2009)也获得了类似的观察结果。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

所有菌株在菌落颜色、形状、边缘、质地以及培养基底面颜色方面均存在差异。

菌落颜色由浅橄榄绿色到深橄榄绿色不等,也包括灰白色。菌落大多为不规则形、具有同心轮纹的规则形或无同心轮纹的规则形,菌落边缘则包括全缘、不规则和波浪状。

所有菌株的菌丝生长类型包括扩散型、蓬松型和绒状型。从培养皿底部观察,可见培养基颜色为灰色至棕色,并存在一定程度的差异。

这些结果与Pusz(2009)的研究结果一致,其发现从反枝苋(Amaranthus retroflexus)中分离的 A. alternata 菌落颜色由浅灰色至深灰色不等。

同样,Rai and Kumari(2009)在侵染长春花的 A. alternata 中观察到疏松、棉絮状、致密及紧实等菌落类型,菌落颜色从浅黑色至深黑色不等。

Hubballi et al.(2011)则发现,15个 A. alternata 菌株在色素形成方面存在差异,可产生黑色、棕黑色、绿黑色、棕色和黄色色素。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

从形态学特征来看,不同 A. porri 菌株在分生孢子产生量、产孢、分生孢子形状和颜色、分隔数量以及分生孢子大小等方面均存在差异。

不同菌株的分生孢子产生量为 7.720×10³~47.02×10³个/mm²

类似地,Daniel et al.(2008)观察到,不同 A. alternata 菌株的分生孢子产生量为 2.8×10⁵~17.2×10⁵个/mL

本研究中,不同菌株的产孢时间在3~11天之间变化。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

所有菌株产生的分生孢子颜色从浅棕色到深棕色不等,形状为直形或弯曲形。

类似地,Kaul and Saxena(1988)发现 A. solani 不同菌株在颜色、形状及产孢能力方面存在差异。

Goyal et al.(2011)报道,从不同地理区域采集的13个 A. brassicae 菌株在产孢方面存在差异。Ansari et al.(1989)、Patni et al.(2005)及Kaur et al.(2007)也发现 Alternaria 属菌株的产孢能力存在变异。

不同菌株的分生孢子横隔和纵隔数量均存在显著差异。横隔数为3~6个,纵隔数为1~2个。

最高平均横隔数为3.56,最低为3.20;最高平均纵隔数为1.40,最低为1.13。

本研究中,分生孢子大小的总体范围为:

11.20~39.20 × 4.76~11.43 μm。

Sofi et al.(2013)报道的平均分生孢子大小为21.36~31.74 × 8.34~14.48 μm。

Rotem(1966)研究42个 A. solani 菌株时,也发现其孢子尺寸存在较大的变异。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

不同菌株在叶片病斑大小方面表现出明显的致病性差异。

最高叶片病斑增长速率为 7.55 mm/天,最低为 2.77 mm/天。本研究中的不同菌株在叶片感染速率方面也表现出周期性变化,但所有菌株的叶片感染速率从接种后第5天至第17天总体呈增加趋势。

这一结果与Thrall et al.(2005)的研究一致。该研究发现,不同 A. brassicicola 菌株在伤口接种海滨卡基莱(Cakile maritima)后所形成的病斑大小存在显著差异。

Kumar(2004)也报道,不同 A. triticina 菌株在病斑大小和病斑数量方面存在变异。

然而,本研究的结果与Quayyum et al.(2005)的研究不同。后者在离体人参小叶上研究 A. panax 菌株时,并未发现不同菌株产生的病斑之间存在显著差异。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf) (10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

结论

所有菌株在培养性状、形态学特征及致病性方面均表现出变异。

无论菌株来源作物及地理区域如何,不同 A. porri 菌株在PDA培养基上的生长、产孢及分生孢子形态均存在显著差异。

所有菌株对其相应寄主均表现出致病性。

这些真菌分离物在特征上与 A. porri 具有高度一致性,其更详细的变异和多样性还可进一步通过分子水平的研究加以分析。

这将有助于揭示孟加拉国 A. porri 的真实特性,并为制定适当、可持续的洋葱紫斑病防治措施提供依据。(10110-Manuscript-39139-2-10-20160617.pdf)

参考文献部分按你的要求省略。

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