3)按你课题定制的“一页总览技术路线图”(文字版,可直接照着画) ① 模型构建(输入/平台) 供体...
創建於:2025年12月25日
使用 GPT-5.1 Thinking 回答 Chat01
創建於:2025年12月25日
使用 GPT-5.1 Thinking 回答 Chat01
3)按你课题定制的“一页总览技术路线图”(文字版,可直接照着画)
① 模型构建(输入/平台)
供体:Mx1‑Cre;Jak2V617F + poly(I:C)诱导
受体:WT 或 Ldlr‑/‑;建立全量嵌合与20%嵌合(CHIP模拟)
质控:嵌合率(CD45/GFP)、血常规(中性粒/血小板等协变量)
诱导:WTD 7周形成粥样硬化(分组并行)
② 目标1:表型解析(“有没有、强不强、发生在什么时候”)
斑块负担:全主动脉ORO + 主动脉根部切片(H&E/Masson/PSR)
中性粒细胞浸润/炎症:Ly6G、MPO(IF/IHC);血浆炎症因子(ELISA)
血小板‑白细胞互作:NPA/MPA(流式)
内皮互作:活体显微镜(滚动/黏附)+ 剪切流黏附实验
③ 目标2:机制解析(“为什么——通路→代谢→功能”)
通路:p‑S6/p‑4EBP1(Phosflow/IF)+ HIF‑1α核定位/表达
代谢表型:脂滴(BODIPY)、脂肪酸摄取(BODIPY‑C16)、胆固醇(filipin)
组学证据:中性粒细胞RNA‑seq + 脂质组/代谢组(必要时±¹³C示踪)
功能输出:NETosis(SYTOX、CitH3、MPO‑DNA)、ROS、趋化/黏附
④ 目标3:干预与转化(“能不能逆转——靶点命中与结局改善”)
体内干预:雷帕霉素抑制mTOR(±HIF通路调控对照)
体外/Ex vivo:中性粒细胞短期药物处理,验证表型可逆与因果一致
终点:斑块面积、坏死核心、胶原/纤维帽等稳定性指标 + 循环NETs/炎症因子
安全性:体重、CBC、肝肾功能、感染事件监测
⑤ 输出(图最右边写“deliverables”)
机制闭环:通路→代谢→功能→斑块结局
生物标志物:pS6、HIF‑1α、脂滴/NETs指标(动物↔人群可对照)
转化路径:雷帕霉素 target engagement(机制响应)→探索性临床研究依据
4)画图时评审最在意的 6 个“加分点”(你图里最好显式画出来)
对照组清晰:WT→Ldlr‑/‑ vs Jak2V617F→Ldlr‑/‑;干预组并行
CHIP模拟突出:20%嵌合是你的亮点之一,建议在模型框里加粗/标色
“因果验证”而不止“相关”:体外短期药物处理 + 体内干预形成“可逆性证据”
关键读出对齐假说:mTOR读出(pS6)+ HIF‑1α + 脂滴/脂质组 + NETs
多组学不是堆砌:把组学放在“机制”框里作为“证据层”,并在箭头上写“通路富集/GSEA/FDR”
基于以上内容和大致逻辑,绘制一个竖版技术路线图,要求每个框内是精简的短语,用中文
直接给你一个可以照抄的“竖版文字草图”,你按这个去画就行(每一条就是框里的短语)。
text【Jak2V617F-CHIP 中性粒-mTOR/HIF-1α-代谢-NETs 驱动粥样硬化 技术路线图(竖版)】
text【模型构建:Jak2V617F-CHIP 粥样硬化模型】 供体:Mx1-Cre;Jak2V617F 骨髓(CD45/GFP) 受体:WT 或 Ldlr-/- 小鼠 嵌合:全量 vs 20% Jak2V617F 嵌合(CHIP模拟,重点标色) 诱导:poly(I:C) 激活 Jak2V617F 饮食:WTD 7 周→粥样硬化形成 组别:WT→Ldlr-/- vs Jak2V617F→Ldlr-/-(干预组并行) 质控:嵌合率(CD45/GFP)、血常规(中性粒/血小板等)
图形:最上方一个大框,下面一根竖直主箭头向下,连到目标1。
text【目标1:表型解析(有没有、强不强、何时发生)】 斑块负担:全主动脉 ORO + 根部 H&E/Masson/PSR 中性粒浸润:Ly6G/MPO IF 或 IHC 全身炎症:血浆炎症因子 ELISA 血小板-白细胞互作:NPA/MPA 流式 内皮互作:活体显微(滚动/黏附)+ 剪切流黏附实验 时间设计:WTD 7 周为主,必要时多时间点随访
text【目标2:机制解析(通路→代谢→功能)】 通路:mTOR 激活(p-S6/p-4EBP1)+ HIF-1α 核定位/表达 代谢表型:脂滴(BODIPY)、脂肪酸摄取(BODIPY-C16)、胆固醇(filipin) 组学证据:中性粒 RNA-seq + 脂质组/代谢组 箭头标注:通路富集 / GSEA / FDR(机制“证据层”) 功能输出:NETosis(SYTOX、CitH3、MPO-DNA) 其它功能:ROS 产生、趋化/黏附能力
这里把“多组学”明确画在机制框里,并在从表型→机制、机制内部子模块之间的箭头上写“小字:通路富集/GSEA/FDR”。
text【目标3:干预与转化(能不能逆转)】 体内干预:雷帕霉素 抑制 mTOR(± HIF 通路调控对照) 干预组设计:WT→Ldlr-/- vs Jak2V617F→Ldlr-/-(± 雷帕霉素) 体外 / Ex vivo:中性粒短期药物处理 → 表型可逆性 / 因果验证 斑块结局:面积、坏死核心、胶原含量 / 纤维帽厚度(稳定性) 循环读数:NETs(MPO-DNA、CitH3)+ 炎症因子 安全性:体重、CBC、肝肾功能、感染事件监测
这里明确体现“因果验证”:体内干预 + 体外短期处理,两条并行证据链。
这列画在所有目标框的右边,从上到下一个长框或几个小框,旁边用横箭头从目标1/2/3指向它。
text【Deliverables(输出)】 机制闭环:mTOR/HIF-1α → 代谢重编程 → NETosis → 斑块负担与稳定性 关键标志物:p-S6、HIF-1α、脂滴负荷、NETs 指标 动物-人群对照:CHIP 携带者中性粒 mTOR/HIF-1α/NETs 标志物 转化路径:雷帕霉素 target engagement(p-S6/HIF-1α/脂滴/NETs 响应) 临床前依据:为探索性临床研究提供剂量与终点设计参考
画图时可以顺手在合适位置加小字/粗体,保证评审一眼能看见:
你可以就按“上中下主干 + 右侧 Deliverables 列”的结构画成一页竖版图,框内直接用我给你的这些短语即可。